zui近，站上關(guān)于ELISA試劑盒的討論帖子非常多，今天也發(fā)表一下自己的一些看法，對(duì)ELISA的見(jiàn)解有不對(duì)的地方，希望指正或者直接拍磚。
首先，談一下市場(chǎng)。首先RnD和Bender等一些的ELISA試劑盒還是很值得信賴的，也得到了市場(chǎng)的認(rèn)可，特別是RnD的盒子，我們賣的很好，就是價(jià)格好貴，經(jīng)費(fèi)不是很充裕的實(shí)驗(yàn)室難消費(fèi)的起。國(guó)內(nèi)的廠家，質(zhì)量在靈敏度上和RnD的盒子還是有很大差距，但是有一點(diǎn)是可以肯定的，盒子反映的結(jié)果是公正客觀的。還有一個(gè)缺點(diǎn)就是廠家可供選擇的盒子種類比較少，主要集中在炎癥細(xì)胞因子上。
    第二，談一下如何靈活應(yīng)用ELISA這個(gè)檢測(cè)方法以及如何去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個(gè)方法的原理，大家都很清楚，網(wǎng)上的資料一大堆。可真正用起來(lái)的時(shí)候，有時(shí)候就有點(diǎn)犯糊涂，我談一下自己的理解。
1、有些客戶會(huì)用OVA（卵清蛋白）做一些哮喘，過(guò)敏性腸炎的模型，后來(lái)會(huì)檢測(cè)粘膜特異性的sIgA以及血清里面IgG，IgE等指標(biāo)。當(dāng)客戶向我咨詢購(gòu)買這幾個(gè)指標(biāo)的盒子的時(shí)候，我很肯定地說(shuō)這些指標(biāo)的檢測(cè)要你自己特制，不會(huì)有商品化的盒子出售的。
2、對(duì)于一些小分子的檢測(cè)，比如前列腺素、糖皮質(zhì)激素的檢測(cè)，我的理解是要用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA去檢測(cè)，也要購(gòu)買采用這個(gè)方法的盒子。一般細(xì)胞因子的檢測(cè)，都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測(cè)，因?yàn)橐蜃臃肿恿勘容^大，一般10幾個(gè)KD左右，很容易找到兩個(gè)或者多個(gè)抗原表位。而小分子很難找到兩個(gè)不同的表位，也就決定了包被抗體和檢測(cè)抗體無(wú)法同時(shí)結(jié)合小分子并固相化。解決方案就是酶標(biāo)板上包被二抗，每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子，然后加樣品，再加不帶標(biāo)記的檢測(cè)抗體，顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高，吸光度越低。
3、對(duì)于胰島素的檢測(cè)，我還是推薦millpore 旗下LInco公司的檢測(cè)試劑盒，不管是放免還是ELISA，據(jù)說(shuō)權(quán)在他們手中。
4、做實(shí)驗(yàn)面向的ELISA試劑盒種屬主要是人，大鼠和小鼠，現(xiàn)在市面上雞、牛、馬、羊、兔各種指標(biāo)的盒子都有售，真不知道這些抗體是怎么來(lái)的，。據(jù)我所了解，這些炎癥指標(biāo)還是有很大種屬特異性的。
5、好多客戶有個(gè)誤區(qū)，拿來(lái)一個(gè)指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測(cè)，其實(shí)應(yīng)該多動(dòng)腦，該檢測(cè)活性的檢測(cè)活性，該做western的做western。ELISA試劑盒檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，靈敏度高，